三種消毒劑檢測方法分析對比

　　三種消毒劑檢測方法分析對比
　　對三種消毒劑檢測方法戊二醛溶液，二氯異氰尿酸鈉溶液系滅枯草桿菌黑色變種芽孢的效果進(jìn)行了比較。結果， 用歐洲標準懸液定量殺菌試驗． 改良歐洲懸液定量殺菌試驗和載體浸泡定量殺菌試驗檢測含戊二醛2％ (g／m1)溶液殺滅枯草桿菌黑色變種芽化達消毒合格標準， 作用時(shí)間分別為2.5．3.0，2.0 h。用前兩方法檢測含有效氯4 500 mg／L的二氯異氰尿酸鈉溶液及用載體方法檢測含有效氯l 000 mg／L該液殺滅枯草桿菌黑色變種芽孢達消毒合格標準，作用時(shí)間分別為30，20．10 min。當染菌片的芽孢懸液中增含小牛血清50%(ml／m1)時(shí)， 用載體方法檢測含有效氯5 000 mg／L的二氯異氰尿酸鈉溶液殺滅該芽孢達消毒合格標準，作用時(shí)間近20 min， 與用歐洲標準懸液法檢測者（30 min)相近 表明三種方法檢測受有機物影響較小的戊二醛殺菌效果相差較小，檢測受有機物影響較大的二氯異氰尿酸鈉殺菌效果相差較大。后者可能與方法中含有機物多少有關(guān)。
　　消毒劑檢測方法
　　1、消毒劑檢測菌懸液與菌片的制備
　　在歐洲標準懸液法和改良歐洲懸液法中， 用含胰蛋白胨0，1％ (g／m1) 和氯化鈉0，85％ (g／m1) 的去離子水溶液(pH6 8～7 0)， 將枯草桿菌黑色變種(ATCC9372）芽孢稀釋至規定含菌量的懸液。在載體法中， 用含蛋白胨0．1％ (g／m1)的磷酸鹽緩沖液(PBS， pH 7．2～7，4)制成的枯草桿菌黑色變種芽孢懸液滴染1，0 cm×1，0 cm 布片， 制成菌片。
　　2、消毒劑檢測中和劑選擇試驗
　　因懸液法中和劑選擇試驗結果可適用于載體試驗中， 故試驗用歐洲標準懸液法進(jìn)行。試驗設6組， 第l組到第5組， 皆將0．5 ml含牛血清白蛋白(SIGMA公司產(chǎn)) 3％ (g／m1) 的去離子水溶液(過(guò)濾除菌后使用) 加入無(wú)菌試管中， 再加0，5 ml枯草桿菌黑色變種芽孢懸液， 混勻。然后， 第l、2組均加入4．0 ml消毒劑溶液(用標準硬水配制)， 作用至預定時(shí)間， 第l組吸取0，5 ml加到含有4．5 ml PBS的試管中， 第2組吸取0，5 ml加到含有4 5 ml中和劑溶液的試管中； 第3組加入4．0 ml中和劑溶液， 作用 預定時(shí)間， 吸取0、5 ml加到含有4，5 ml中和劑溶液的試管中； 第4組加入4．0 ml中和產(chǎn)物(1份消毒劑溶液加4份中和劑溶液， 中和作用l0 min) 溶液，作用至預定時(shí)間， 吸取0．5 ml加到含有4．5ml中和產(chǎn)物溶液的試管中： 第5組加入4．0ml PBS， 作用至預定時(shí)間， 吸取0．5 ml加到含有4．5 ml PBS的試管中。第6組為中和劑溶液、中和產(chǎn)物溶液和胰蛋白胨大豆蛋白胨培養基(TSA)陰性對照。試驗結果，以第l組不長(cháng)菌或長(cháng)菌量遠低于第2組， 第2組長(cháng)菌量不低于l00 cfu／ml， 第3、4、5組長(cháng)菌量達5．0×l0 ～5．0×l0。cfu／ml且組間菌數相差不超過(guò)l0％ ， 第6組不長(cháng)菌， 為所選中和劑合適。
　　3、消毒劑檢測定量殺菌試驗
　　歐洲標準懸液定量殺菌試驗 向試管內加入0．5 ml含牛血清白蛋白3％(g／m1) 的去離子水溶液和0．5 ml枯草桿菌黑色變種芽孢懸液， 混勻， 再加入4．0 ml消毒劑溶液(陽(yáng)性對照組為無(wú)菌蒸餾水)，混勻并立即記時(shí)。作用至規定時(shí)間， 取0．5ml混懸液， 加于4．5 ml中和劑溶液中， 混勻。中和作用l0 min， 取0．5 ml該液或其稀釋液接種無(wú)菌平皿， 一式兩份。傾注l8～ 20 ml TSA 培養基， 混勻。置(37±1)℃培養72 h， 計數菌落數， 計算殺滅率。