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          如何分清儀器檢出限、方法檢出限、樣品檢出限

          發(fā)布時(shí)間: 2018-02-02  點(diǎn)擊次數: 3309次

          儀器檢出限

           

          指分析儀器能夠檢測的被分析物的zui低量或zui低濃度。儀器檢出限一般用于不同儀器的性能比較。一般通過(guò)多次空白試驗,求得其背景響應的標準差,將三倍空白標準差(3δ)作為檢測限的估計值。也可用已知濃度的樣品與空白試驗對照,記錄測得的被測樣品信號強度S與噪音(或背景信號)強度N,以能達到S/N=2S/N=3時(shí)的樣品zui低濃度為LOD(Limit of Detection)。如用非儀器分析方法時(shí),通過(guò)已知濃度的樣品分析來(lái)確定可檢出的zui低水平作為檢出限。

           

          表示方法常為:1.zui低檢出濃度:滿(mǎn)足zui低檢出限要求時(shí),進(jìn)樣供試品溶液的濃度,常見(jiàn)單位:mg/mL,ng/mL,mol/L等。2,zui低檢出量:zui低檢出量=zui低檢出濃度×進(jìn)樣量,常見(jiàn)單位:ng,pg,fg等。

           

          方法檢出限

           

          方法檢出限不僅與儀器的噪音有關(guān),還取決于樣品測定的整個(gè)環(huán)節,如取樣量,提取分離以及測定條件的優(yōu)化等,實(shí)際工作中應注明具體實(shí)驗條件。

           

          例如:檢測某化合物XY時(shí),方法中規定取樣100mg,經(jīng)提取處理后定容為10ml分析,此時(shí)方法的檢出限為1μg/g。若改變方法使取樣量增加至1g,則方法檢出限為0.1μg/g。若改變方法使取樣量增加至1g且經(jīng)提取處理后定容為1ml,則方法檢出限為0.01μg/g。

           

          樣品檢出限

           

          即單個(gè)樣品的檢出限。分析方法檢出限采用的是一系列標準物質(zhì),基體各不相同,因此只能是一類(lèi)型樣品的平均檢出限,并非嚴格適用于單個(gè)樣品。對于單個(gè)樣品確定檢出限,必須固定樣品基體,即樣品檢出限的確定應使用樣品本身,采取標準加入法作出和方法檢出限類(lèi)似的曲線(xiàn),使用外推法進(jìn)行計算。當樣品中待測元素含量較高時(shí),此類(lèi)檢出限的確定不具有明顯的意義。

          檢出限主要取決于3個(gè)方面:

          1.分析方法的選擇性和專(zhuān)一性;

          2.分析方法的靈敏度;

          3.分析方法的精密度。

          儀器檢出限不考慮任何樣品制備步驟的影響,一般以溶劑空白測定檢出限,因此其值總是比方法檢出限低。一般以空白測量的3倍標準差為檢出限。 10倍標準差為定量測定下限(LOD,Limit of Determination)。當測定結果不大于檢出*報告為未檢出;當測定結果大于檢出限且不大于定量測定下*,報告為定性檢出;當測定結果大于定量測定下*,報告定量結果。

          樣品的定量結果應在標準曲線(xiàn)范圍內,不準外推計算,外推結果沒(méi)有經(jīng)過(guò)方法學(xué)驗證,無(wú)法確定其準確性。樣品太濃應稀釋?zhuān)t應濃縮,使之落在標準曲線(xiàn)范圍內,故準確地說(shuō)定量下限應指標準曲線(xiàn)的zui低濃度點(diǎn)。

          測定范圍(也稱(chēng)有效測定范圍)

          指在限定誤差能滿(mǎn)足預定要求的前提下,特定方法的測定下限至測定上限之間的濃度范圍。在此范圍內能夠準確地定量測定待測物質(zhì)的濃度或量。 

          測定范圍應小于方法的適應范圍。對測量結果的精密度(通常以相對標準偏差表示)要求越高,相應的測定范圍越小。

           

          方法的線(xiàn)性范圍

          方法的線(xiàn)性范圍是指信號與樣品濃度呈線(xiàn)性的工作曲線(xiàn)直線(xiàn)部分。通常把相當于10倍空白的標準偏差相應的濃度定為方法的線(xiàn)性范圍的定量檢測下限。取工作曲線(xiàn)中高濃度時(shí),彎曲處作為方法的線(xiàn)性范圍的定量檢測上限。好的分析方法要有寬的線(xiàn)性范圍。有的分析方法線(xiàn)性范圍只有一個(gè)數量級,有的分析方法線(xiàn)性范圍可達56個(gè)數量級。同一分析方法可用常量、微量、痕量的物質(zhì)分析。

           

          檢出限相關(guān)Q&A(5個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題)

           

          Q:儀器檢出限和方法檢出限都是怎樣求出來(lái)的?儀器檢出限和方法檢出限哪個(gè)低?

          A:檢出限,就是一般用的檢測通道測定越來(lái)越小的濃度,直到該元素得不到強度值,為儀器該元素的檢出限。方法的檢出限因為儀器不一樣,計算不同,但是一般可認為方法測定中3倍的空白的SD,可估算為方法的檢出限。方法檢出限是3倍信噪比,儀器檢出限應該是儀器本身的。

           

          當然儀器檢出限要比方法檢出限低,在平時(shí)質(zhì)譜和色譜分析中LOD是指某種物質(zhì)在某種檢測器上的定性檢出限,S/N要大于或等于3;而LOQ是量限,S/N大于或等于10,方法檢出限準確的說(shuō)是MDL,當然也有用LOD的。

           

          儀器檢出限和方法檢出限大小不一定。儀器檢出限指儀器能檢出濃度,方法檢出限是通過(guò)儀器檢出限,以及樣品稱(chēng)樣量和稀釋倍數計算出來(lái)的,是根據方法來(lái)得。單位也不定一樣。比如儀器檢出限為1μg/mL,方法檢出限的方法中,所配樣品濃度為1g/mL,那么方法檢出限為1μg/1g=1ppm;如果樣品濃度為0.1g/mL,測方法檢出限為1μg/0.1g=10ppm。

           

          Q:檢測方法是氣相色譜,想問(wèn)下大家怎么確定檢出限和線(xiàn)性范圍,還有富集倍數又是如何得到?

          A:檢出限是三倍的信噪比,線(xiàn)性范圍可以一個(gè)標準品,看一下新響應值:峰面積或者峰高都可以,在進(jìn)一個(gè)樣品看看,初步估算一下樣品的濃度,再確定范圍。

          1.檢出限 信噪比為3時(shí)你能出峰的位置,你只有不停地往下試,知道信噪比低于3,你就不能往下做了。

          2.檢出限 下限是檢出限濃度,上限要包含你實(shí)驗中的zui高濃度,稍微比它稍高就可以了。

          3.富集倍數 是你萃取后的濃度與初始濃度之比。

           

           

          Q:液相色譜、液質(zhì)的方法線(xiàn)性范圍,加標回收率等怎么驗證?

          A:1.已知確定濃度的樣品中準確加入一定量的對照(10ppb),進(jìn)行測定,扣除樣品的已知濃度,計算加入的樣品量。計算得到的量與實(shí)際加入量的比值即為回收率。這種計算方法為加標回收(相對輔料+對照的回收方法)。

           

          2.線(xiàn)性范圍的確定以含量測定的濃度水平?jīng)Q定,以測定的圖譜行為進(jìn)行判斷。一般采用含量測定的濃度上下可以各選幾個(gè)點(diǎn)(線(xiàn)性總數n>6)進(jìn)行測定。如果是殘留或有關(guān)物質(zhì),含量較低,可以從定量限開(kāi)始進(jìn)行線(xiàn)性考察。

           

          3.就我所知,定量限和檢出限只能不斷稀釋測定。不過(guò)可以預期,開(kāi)始稀釋的倍數盡量大,實(shí)在不行從低濃度向高濃度試驗還可以避免殘留影響。

           

          Q:信噪比、方法zui低檢出限、檢測范圍等,請講解一下這些值的定義?

          A:用液相作方法的時(shí)候,常常要注明信噪比、方法zui低檢出限、檢測范圍等。信噪比狹義來(lái)講是指放大器的輸出信號的電壓與同時(shí)輸出的噪聲電壓的比;方法檢出限指3倍儀器背景信號對應被測物濃度值,檢測范圍指zui低與zui高檢測濃度之間范圍;zui低檢出限,是3倍噪音對應的樣品濃度;

           

          一般做方法驗證的時(shí)候,做有關(guān)物質(zhì)的檢測需要做信噪比為3(也有為2)的zui低檢測限實(shí)驗。做定量要做信噪比為10的zui低定量限的檢測。這個(gè)一般儀器里會(huì )有這樣的方法。把樣品按方法稀釋成為一系列的濃度,然后分別進(jìn)樣,選擇沒(méi)有峰出現的基線(xiàn)很平的地方為對照,可以根據儀器的計算得到相應的信噪比,選擇信噪比大于3/10的zui低濃度就是檢測限/定量限。

           

          檢測范圍一般是成線(xiàn)性的濃度范圍。也是稀釋幾個(gè)濃度段(70%~130%),用得到的峰面積做相關(guān)系數計算。

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